Fluorescentie In Situ Hibridisasie
Fluorescensie in situ- hibridisasie (FISH) is een van verskeie tegnieke wat gebruik word om DNA se DNA se soektog te soek, na die teenwoordigheid of afwesigheid van spesifieke gene of gedeeltes van gene.
Baie verskillende soorte kanker word geassosieer met bekende genetiese abnormaliteite. En deur geneties praat ons nie net oor oorerwing nie. Selle kan oor 'n leeftyd foute maak wanneer hulle verdeel en groei.
Mutasies in die DNA wat met kanker geassosieer word, kan in hierdie selle ophoop.
Hoe werk viswerk?
FISH is 'n tegniek wat gebruik maak van fluorescerende probes om spesifieke gene of dele van gene (DNA-sekwense) op te spoor. Mediese sentrum laboratorium personeel en onkoloë gebruik FISH om te help om pasiënte wat kanker het, te assesseer, en soms om 'n pasiënt wat reeds met kanker gediagnoseer is, te monitor en behandel te word.
VISS kan gedoen word met behulp van verskillende soorte monsters volgens die ligging en die tipe kanker wat vermoed word: Tumorselle verkry uit perifere bloed, van 'n beenmurgbiopsie of van 'n limfknoopbiopsie, en formalin-vasgestelde paraffien-ingebedde weefsel (dit verwys na 'n monster weefsel wat in die laboratorium verwerk word en in 'n tipe was ingebed is, wat dit stewiger maak sodat dit in dun afdelings gesny kan word en onder die mikroskoop gekyk word).
Wat beteken die briewe?
Die "H" in FISH verwys na hybridisering.
In molekulêre hibridisasie word 'n gemerkte DNA- of RNA-volgorde gebruik as 'n sonde - visualiseer 'n rooi Lego-baksteen, as jy wil. Die sonde word gebruik om 'n eweknie-Lego-baksteen, of DNA-volgorde, in 'n biologiese monster te vind.
DNA in jou voorbeeld is soos hopies Lego-bakstene, en die meeste bakstene in hierdie hopies stem nie ooreen met ons rooi sonde nie.
En al jou bakstene is netjies georganiseer in 23 pare bakstene. Elke hopie is een van jou gepaarde, homoloë chromosome, min of meer. In teenstelling met Lego stene, is ons rooi Lego sonde soos 'n sterk magneet en vind sy wedstryd sonder om deur die hopies te sorteer.
Die "F" verwys na fluorescensie. Ons rooi sonde kan verlore raak in die stapel stene, dus dit is gemerk met gekleurde fluoresserende kleurstof sodat dit sal gloei. As dit sy wedstryd onder die 23 gepaarde pale vind, word 'n fluorescerende tag die plek van die lig gebring. So, jy kan nou sien hoe navorsers en klinici FISH kan gebruik om te help identifiseer waar (watter hoop, of watter chromosoom) 'n spesifieke geen is vir 'n gegewe individu.
Die "I" en die "S" staan vir in situ . Dit verwys na die feit dat ons rooi Lego-baksteen sy wedstryd soek binne die steekproef wat u gegee het .
Wat oor spesifieke bloedkankers?
VISS en ander in situ- hibridisasieprosedures word gebruik om 'n verskeidenheid chromosomale abnormaliteite te diagnoseer - veranderinge in die genetiese materiaal, veranderinge in chromosome, insluitende die volgende:
Skrapping - deel van 'n chromosoom is weg
Translokasie - deel van een chromosoom breek af en stok op 'n ander chromosoom
Inversie - 'n deel van 'n chromosoom breek af en sit weer in, maar in omgekeerde volgorde
Duplisering - deel van 'n chromosoom is in te veel kopieë in die sel teenwoordig
Elke tipe kanker het sy eie stel chromosomale veranderinge en relevante probes. FISH help nie net om die aanvanklike genetiese veranderinge in 'n siekteproses soos kanker te identifiseer nie, maar dit kan ook gebruik word om reaksie op terapie en siektevergifnis te monitor.
Die genetiese veranderinge wat deur FISH opgespoor word, bied soms addisionele inligting oor hoe die individu se kanker waarskynlik sal optree, gegrond op wat in die verlede waargeneem is aan mense met dieselfde soort kanker en soortgelyke genetiese veranderinge. Soms word FISH gebruik nadat die diagnose reeds gemaak is, om addisionele inligting te verkry wat kan help om 'n pasiënt se uitkoms of beste behandeling te voorspel.
FISH kan chromosomale abnormaliteite in leukemieë identifiseer , insluitende chroniese limfosietiese leukemie (CLL). Vir chroniese limfosietiese leukemie / klein limfosietiese limfoom, bied FISH pasiënte om hul prognostiese kategorie uit te vind: goed, intermediêr of arm. By akute limfoblastiese leukemie (ALL) kan die genetika van die leukemiese selle u vertel van die risiko van kanker en help om terapeutiese besluite te lei.
Vispanele is ook beskikbaar vir limfoom, veelvuldige myeloom, plasmaselle proliferatiewe versteurings en myelodisplastiese sindroom. In die geval van mantel sel limfoom, byvoorbeeld, is daar 'n translokasie wat FISH kan genaamd GH / CCND1 t (11; 14) wat gereeld geassosieer word met hierdie limfoom, opspoor.
Hoekom VIS?
'N Voordeel van FISH is dat dit nie op selle wat aktief verdeel is, verrig moet word nie. Sytogenetiese toetse duur gewoonlik ongeveer drie weke, want die kankerselle moet ongeveer 2 weke lank in laboratoriumskottels groei voordat dit getoets kan word. In teenstelling, FISH resultate is gewoonlik beskikbaar in die laboratorium binne 'n paar dae.
> Bronne:
> Kanker Cytogenetiese Toets CPT Codes.
> Fluorescentie In Situ Hibridisasie (VIS). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescentie In Situ Hibridisasie (VIS). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Leiding vir Fluorescentie in Situ Hibridisietoetsing in Hematologiese Siektes. Die Tydskrif van Molekulêre Diagnostiek: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.