Hoe werk MIV-genetiese weerstandstoetsing?

Genotipering en fenotipering kan die MIV-weerstand teen MIV identifiseer, en selfs voorspel

Selfs vir mense met optimale nakoming van terapie, word verwag dat 'n mate van MIV-dwelmweerstand oor tyd as gevolg van natuurlike mutasies van die virus ontwikkel. In ander gevalle kan weerstand vinnig ontwikkel wanneer suboptimale adhesie dit toelaat dat weerstandbiedende MIV-populasies gedy, wat uiteindelik lei tot behandelingsmislukking.

Wanneer behandelingsmislukking voorkom, moet alternatiewe geneesmiddelkombinasies gekies word om hierdie nuwe populasie weerstandbiedende virus te onderdruk.

Genetiese weerstandstoetsing help dit om die tipes weerstandige mutasies in 'n mens se "virale swembad" te identifiseer, terwyl jy vasstel hoe vatbare daardie virusse moontlike antiretrovirale middels is .

Twee primêre gereedskap word gebruik vir die toetsing van genetiese weerstand in MIV: die MIV-genotipiese toets en die MIV-fenotipiese toets .

Wat is 'n genotipe en 'n fenotipe?

Per definisie is 'n genotipe bloot die genetiese samestelling van 'n organisme, terwyl 'n fenotipe die waarneembare eienskappe of eienskappe van daardie organisme is.

Genotipiese toetse (of genotipering) funksie deur die oorerflike instruksies binne 'n sel se genetiese kodering of DNA te identifiseer. Fenotipiese toetse (of fenotipering) bevestig die uitdrukking van daardie instruksies onder die invloed van verskillende omgewingstoestande.

Terwyl die verband tussen genotipe en fenotipe nie absoluut is nie, kan genotipering dikwels voorspelbaar wees van fenotipe, veral as veranderinge in die genetiese kode aan verwagte veranderinge in eienskappe of eienskappe gee, soos in die geval van ontwikkelende geneesmiddelweerstand.

Fenotipering, aan die ander kant, bevestig die "hier-en-nou." Dit beoog om 'n organisme se reaksie op spesifieke veranderinge in die omgewingsdruk te assesseer, soos wanneer MIV blootgestel word aan verskillende medisyne en / of dwelm konsentrasies.

Verduidelik MIV Genotipering

MIV-genotipering is algemeen die mees algemene tegnologie wat gebruik word vir weerstandstoetsing.

Die doel van die toets is om spesifieke genetiese mutasies in die gag-pol- streek van die virus se genoom (of genetiese kode) op te spoor. Dit is die gebied waar omgekeerde transkriptase, protease en integrasienzyme - die teikens van die meeste antiretrovirale middels - wat op die DNA-ketting gekodeer word.

Deur die MIV-genoom eers te versterk deur die gebruik van polimerase kettingreaksie- tegnologie (PCR) tegnologie, kan laboratoriumtegnici die genetika van die virus orden (of "map") deur gebruik te maak van verskeie mutasie-opsporingstegnologieë.

Tesisse mutasies (of akkumulasie van mutasies) word vertolk deur tegnici wat die verwantskap tussen die geïdentifiseerde mutasies en die virus se verwagte vatbaarheid vir verskillende antiretrovirale middels analiseer. Aanlyn databasisse kan help deur die toetsreekse te vergelyk met dié van 'n prototipe "wild-tipe" virus (dws MIV wat geen weerstandige mutasies bevat nie).

Die interpretasie van hierdie toetse word gebruik om geneesmiddelontvangbaarheid te bepaal, met die groter aantal sleutelmutasies wat tot hoër vlakke van geneesmiddelweerstandigheid lei .

Verduidelik MIV-feno-tipering

MIV-fenotipering assesseer die groei van die persoon se MIV in die teenwoordigheid van 'n geneesmiddel, en vergelyk dit met die groei van 'n beheer, wilde tipe virus in dieselfde geneesmiddel.

Soos met genotipiese toetse, versterk fenotipiese toetse die gag-pol-streek van die MIV-genoom.

Hierdie gedeelte van die genetiese kode word dan "ingeënt" op 'n wildtipe kloon deur gebruik te maak van rekombinante DNA-tegnologie . Die gevolglike rekombinante virus word gebruik om soogdier selle in vitro (in die laboratorium) te besmet.

Die virusmonster word dan blootgestel aan toenemende konsentrasies van verskillende antiretrovirale middels totdat 50% en 90% virale onderdrukking bereik word. Die konsentrasies word dan vergelyk met die resultate van die beheer, wild-tipe monster.

Die relatiewe "vou" veranderinge verskaf die waardebereik waardeur geneesmiddelontvangbaarheid bepaal word. 'N Viervoudige verandering beteken eenvoudig dat vier keer die hoeveelheid dwelm benodig word om virale onderdrukking te behaal in vergelyking met dié van die wilde tipe.

Hoe groter die vouwaarde, hoe minder vatbaar die virus is vir 'n spesifieke medikasie.

Hierdie waardes word dan in laer-kliniese en boonste kliniese wisselbane geplaas, met boonste waardes wat tot hoër vlakke van geneesmiddelweerstand lei. (Sien voorbeeldverslag .)

Wanneer word 'n genetiese weerstandstoets uitgevoer?

In die VSA word genetiese weerstandstoetsing tradisioneel op behandeling naïef pasiënte uitgevoer om vas te stel of hulle 'n "verkry" dwelmweerstand het. Studies in die VSA dui daarop dat tussen 6% en 16% van die oorgedraagde virus weerstand bied teen ten minste een antiretrovirale geneesmiddel, terwyl byna 5% weerstandbiedend is vir meer as een klas medisyne.

Genetiese weerstandstoetsing word ook gebruik wanneer dwelmweerstand by individue op terapie vermoed word. Toetse word uitgevoer terwyl die pasiënt óf die fisiese behandeling neem of binne vier weke van die beëindiging van die behandeling indien die viruslading groter as 500 kopieë / ml is. Genotipiese toetsing word gewoonlik verkies in hierdie gevalle aangesien dit minder kos, 'n vinniger omkeertyd het, en 'n groter sensitiwiteit bied vir die opsporing van mengsels van wildtipe en weerstandbiedende virus.

'N kombinasie van fenotipiese en genotipiese toetsing word algemeen verkies vir persone met komplekse, multi-dwelm weerstand, veral vir diegene wat blootgestel word aan protease inhibeerders .

Bronne:

Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO). "MIV-weerstandbiedende feiteblad." Genève, Switserland; 11 April 2011.

Kim, D .; Ziebell, R .; Saduvala, N .; et al. "Trend in oorgedra MIV-1 ARV dwelm weerstand-geassosieerde mutasies: 10 MIV-toesig gebiede, VSA, 2007-2010." 20ste konferensie oor retrovirusse en opportunistiese infeksies. Atlanta, Georgia; 6 Maart 2013; Mondelinge opsomming 149.

Nasionale Instituut van Gesondheid (NIH). "Riglyne vir die gebruik van antiretrovirale agente in MIV-1-besmette volwassenes en adolessente." Bethesda, Maryland; 11 Oktober 2013.